西安阿里巴斯儀器設備有限公司專注實驗室三十年，專業生產廠家,聯系電話，, 經營項目：一、化學試劑各種優級純、分析純、化學純試劑，工業級（各種包裝）化學試劑、國產、進口化學試劑等二、玻璃儀器各種燒杯、高型燒杯、三角燒杯、塑料燒杯、三角瓶、具塞三角瓶、燒瓶、容量瓶、量筒、量杯、刻度吸管、大肚吸管、刻度移液管、大肚移液管、比色管、試管、稱量瓶、離心管、集氣瓶、抽濾瓶、藍蓋試劑瓶、種子瓶、鋼鐵量瓶、比重瓶、大口試劑瓶、小口試劑瓶、放水瓶、瓶、標本瓶、干燥器、漏斗、砂芯坩堝、砂芯過濾裝置、冷凝管、表面皿、培養皿、比色皿、定砷器、砷鹽裝置、回流裝置、玻璃水槽、比重計、研缽、玻璃管、玻璃棒、壓力計、溫度計、干濕計、酸式滴定管、堿式滴定管、滴定臺、鐵架臺、藥勺、移液槍、濾器、微孔濾膜、進樣器、玻璃注射器、鑷子等玻璃器材三、實驗設備科學儀器：電子天平、旋轉蒸發儀、磁力攪拌器、電動攪拌器、真空干燥箱、鼓風干燥箱、馬弗爐、管式電阻爐、恒溫水浴鍋、恒溫器、真空泵（油、水）、攪拌式高壓反應裝置、水熱式反應釜、天平臺、實驗臺、超聲波清洗器、微波反應器、高速離心機、紅外燈、紫外燈、色譜配件耗材、進樣器、移液槍、各種電極、各種玻璃石英儀器等.

廣泛服務于：科研，制藥，生物，生命科學，教育，污水處理，食品與飲料，電子，輕工業，礦業，石油天然氣，石油化學工業，工業品儀器，環保工程等行業。

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1765 半微量定氮蒸餾器，半微量定氮蒸餾裝置，半微量凱氏定氮儀

1765 半微量定氮蒸餾器，半微量定氮蒸餾裝置，半微量凱氏定氮儀

本器適用半微量蒸餾法測定有機氮的含量。本器不包括實驗所需的蒸汽發生裝置。

每套包括下列另件：

1.蒸餾管 1只；

2.冷凝管 200mm 1只。

白質的定量測定--凱氏定氮法

（1）學習微量凱氏定氮法的原理。

（2）掌握微量凱氏定氮法的操作方法。

實驗原理

生物材料的含氮量測定在生物化學研究中具有一定的意義，如蛋白質的含氮量約為16％，測出含氮量則可推知蛋白含量。生物材料總氮量的測定，通常采用微量凱氏定氮法。凱氏定氮法由于具有測定準確度高，可測定各種不同形態樣品等兩大優點，因而被公認為是測定食品、飼料、種子、生物制品、藥品中蛋白質含量的標準分析方法。其原理如下：

1.消化：有機物與濃硫酸供熱，使有機氮全部轉化為無機氮——硫酸銨。為加快反應，添加硫酸銅和硫酸鉀的混合物；前者為催化劑，后者可提高硫酸沸點。這一步約需30min至1h，視樣品的性質而定。

2.加堿蒸餾：硫酸銨與NaOH(濃)作用生成(NH4)OH,加熱后生成NH3,通過蒸餾導入過量酸中和生成NH4Cl而被吸收。

3.滴定：用過量標準HCl吸收NH3，剩余的酸可用標準NaOH滴定，由所用HCl摩爾數減去滴定耗去的NaOH摩爾數，即為被吸收的NH3摩爾數。此法為回滴法，采用甲基紅衛指示劑。HCl＋NaOHNaCl +H2O

本法適用于0.2 ~ 2.0 mg的氮量測定。

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1.熱源2.燒瓶3.玻璃管4.橡皮管5．玻璃杯6.棒狀玻塞7.反應室8.反應室外殼9.夾子10.反應室中插管11.冷凝管12.錐形瓶13.石棉網

3.4微量凱氏蒸餾裝置示意圖

試劑和器材

一、試劑

濃硫酸；30％過氧化氫溶液；10 M氫氧化鈉；0.01M的標準鹽酸；標準硫酸銨（0.3mg氮/mL）。

催化劑：硫酸銅：硫酸鉀＝1：4混合，研細。

指示劑：0.1％甲基紅乙醇溶液。

二、測試樣品牛血清白蛋白。

三、器材

微量凱氏定氮儀；移液管1mL（×3）；2mL（×1）；微量滴定管5mL（×1）;燒杯200mL（×2）；量筒10mL（×1）；三角燒瓶150mL（×4）；凱氏燒瓶50mL（×4），吸耳球（×1）；電爐；分析天平。

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操作方法

一、樣品處理

稱取牛血清白蛋白50mg，加入2個凱氏燒瓶中，另2個凱氏燒瓶為空白對照，不加樣品。分別在每個凱氏燒瓶中加入約500mg硫酸鉀－硫酸銅混合物，再加5 mL濃硫酸。

二、消化

將以上4個凱氏燒瓶置于通風櫥中電爐上加熱。在消化開始時應控制火力，不要使液體沖到瓶頸。待瓶內水汽蒸完，硫酸開始分解并放出SO2白煙后，適當加強火力，繼續消化,使瓶內液體微微沸騰，大約維持2 ~ 3h。待消化液變成褐色后，為了加速完成消化，可將燒瓶取下，稍冷，將30％過氧化氫溶液1 ~ 2滴加到燒瓶底部消化液中，再繼續消化，直到消化液由淡黃色變成透明淡藍綠色，消化即告完成。冷卻后將瓶中的消化液倒入50mL容量瓶中，并以蒸餾水洗滌燒瓶數次，將洗液并入容量瓶中，定容備用。

三、蒸餾

1.蒸餾器的洗滌

蒸氣發生器中盛有加有數滴H2SO4的蒸餾水和數粒沸石。加熱后，產生的蒸汽經貯液管、反應室至冷凝管，冷凝液體流入接受瓶。每次使用前，需用蒸汽洗滌10分鐘左右（此時可用一小燒杯承接冷凝水）。將一只盛有5mL 2％硼酸液和1 ~ 2滴指示劑的錐形瓶置于冷凝管下端，使冷凝管管口插入液體中，繼續蒸餾1 ~ 2分鐘，如硼酸液顏色不變，表明儀器已洗凈。

2.消化樣品及空白的蒸餾

取50mL錐形瓶數個，各加25mL 0.01M標準HCl和1 ~ 2滴指示劑，用表面皿覆蓋備用。

取2mL稀釋消化液，由小漏斗加入反應室。將一個裝有0.01M標準HCl和指示劑的錐形瓶放在冷凝管下，使冷凝器管口下端浸沒在液體內。

用小量筒量取5mL 10M NaOH溶液，倒入小漏斗，讓NaOH溶液緩慢流入反應室。尚未完全盡時，加緊夾子，向小漏斗加入約5mL蒸餾水，同樣緩緩放入反應室，并留少量水在漏斗內作水封。加熱水蒸氣發生器，沸騰后，關閉收集器活塞。使蒸汽沖入蒸餾瓶內，反應生成的NH3逸出被吸收。待氨已蒸餾完全，移動錐形瓶使液面離開冷凝管口約1cm，并用少量蒸餾水冷凝管口。取下錐形瓶，以0.01M NaOH標準溶液滴定。記下所耗去的體積。

3.蒸餾后蒸餾器的洗滌

蒸餾完畢后，移取熱源，夾緊蒸汽發生器和收集器間的橡皮管，此時由于收集器溫度突然下降，即可將反應室殘液吸至收集器。

標準樣品的測定

在蒸餾樣品及空白前，為了練習蒸餾和滴定操作，可用標準硫酸銨試做實驗2 ~ 3次。

標準硫酸銨的含氮量是0.3mg/mL，每次實驗取2.0mL。

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四、計算

樣品的含氮量（mg/mL）=

若測定的蛋白質含氮部分只是蛋白質（如血清），則：

樣品中蛋白質含量（mg/mL）＝

式中：A為滴定空白用去的NaOH平均mL數，B為滴定樣品用去的NaOH平均mL數，V為樣品的mL數，0.01 NaOH的摩爾濃度，14為氮的原子量，6.25為系數（蛋白質的平均含氮量為16％，由凱氏定氮法測出含氮量，再乘以系數6.25即為蛋白質量），N為樣品的稀釋倍數。

注意事項

（1）必須仔細檢查凱氏定氮儀的各個連接處，保證不漏氣。

（2）凱氏定氮儀必須事先反復清洗，保證潔凈。

（3）小心加樣，切勿使樣品沾污口部、頸部。

（4）消化時，須斜放凱氏燒瓶（45o左右）。火力先小后大，避免黑色消化物濺到瓶口、瓶頸壁上。

（5）蒸餾時，小心加入消化液。加樣時將火力擰小或撤去。蒸餾時，切記火力不穩，否則將發生倒吸現象。

（6）蒸餾后應及時清洗定氮儀。

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